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欲发表的一篇综述:分子进化工程进展

偶认为这个主题很好,希望可以和大家交流。

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分子进化工程进展wzy.doc (121.0k) 这个主题的确有意思。

想问一下,最后一种方法mRNA display技术,比起前两种体内技术是不是效率要低很多?因为我们做过体外的蛋白翻译,比起细胞内的差多了。

2、质粒肽即 LacⅠ-display
原理:通过基因工程的方法将含有随机序列的寡核苷酸片断克隆在质粒载体上LacⅠ(Lac阻遏蛋白)基因的3端,质粒载体还具有Lac阻遏蛋白结合位点。质粒表达后,随机序列肽融合在Lac阻遏蛋白的C端,这种肽-LacⅠ融合蛋白又紧紧结合在编码它们的质粒载体上。,形成稳定的肽-LacⅠ-质粒复合物(即质粒肽)。裂解细胞提取出质粒肽后,可以用固定化受体进行亲和纯化筛选。筛选出的质粒肽可以用电击法重新转化到大肠杆菌中扩增。
质粒肽即 LacⅠ-display最大的局限性在于它不能富集那些能破坏或抑制LacⅠ结合LacO的肽,此外该系统也不能用来筛选会被蛋白酶降解的肽。 多谢指教。

关于质粒肽的问题,主要是因为在多分子体系中目的片断是很少的,质粒肽是一种有效的筛选目的分子的方法。

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作者:admin@医学,生命科学    2010-12-13 05:11
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