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【drug-news】大家帮忙啊
我最近购买了Cell Signaling 的试剂盒（＃9820） P38 MAP Kinase Assay Kit , 我想做的是我得药物对肾小球系膜细胞中该激酶是否有直接的刺激作用，当时一个老师建议，就买了此试剂盒。原理大概就是先用p-P38的抗体将p-P38沉淀下来，再用ATF-2作为底物进行反应，最后用WESTERN分析ATF-2的活化程度来反映P38的活性变化。也就是说该试剂盒是检测P38活性的，并且说明书上说，所有的药物干预是在细胞内进行的，大家试想在细胞内的环境中，是一个多复杂的环境啊，而本人做过WESTERN显示P38是被激活的，但是根本不能说明我得药物对其有无直接作用的因为它很可能是通过其上游来激活的，其他的文献也有类似的报道。那现在就是这个问题：我能不能用该实际盒对沉淀下来的p-P38与我得药物直接在细胞外激酶缓冲液中进行反应，看看有没有什么变化啊？可是又考虑到细胞外的环境和细胞内是有很大的差别的，即使能进行的反应能检测出来吗？而我得试剂盒只有40反应体系，因此现在很是迷茫，望大家有知道相关知识的给予解答，小生不胜感激！！！！！！！！！！！！！！ [标签:content1][标签:content2]
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作者:admin@医学,生命科学 2011-02-24 05:12
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