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【Nature】科学家发明RNA干扰实验新方法
在最新的《自然—方法学》（Nature Methods）杂志上，谢晓亮研究组再次发表文章，提出了利用其研究组自身研发的技术——受激拉曼散射（stimulated Raman scattering，SRS）显微技术进行RNA干扰实验的新方法。
这种新方法利用无需荧光标记的受激拉曼散射显微仪进行定量成像，克服了生化分析方法繁琐的色谱分析等问题，以及CARS显微方法背景信号高，结果不精确等问题，是一种简单精确，适用于高通量分析的新技术。在这篇文章中，研究人员就利用这种方法筛选发现了8个在脂肪储存调控方面的新调控因子。
肥胖是现代社会的一大病症，会引起各种慢性疾病，比如II型糖尿病，心血管疾病等等。为了更好的了解肥胖，及其相关的代谢失序问题，我们需要深入分析脂肪在细胞水平和组织水平堆积的调控机制，目前已经进行了一些模式生物的脂肪储存调控因子的全基因组分析，但是这些还远远不够。
一般线虫脂肪储存调控因子分析方法主要包括传统的生物化学分析方法，比如进行线虫的固定染色，荧光成像等，近期一些研究组报道了利用CARS显微技术来分析。但是这两种方法都存在一些局限性，生化分析方法需要从线虫中提取脂肪，进行繁琐的色谱分析工作，这在基因组水平上是不可能完成，而且使用到的一些有机溶剂也会干扰实验分析。而利用CARS显微技术进行分析又存在背景信号高，灵敏度受限等问题。
这篇文章应用的SRS显微技术能通过对激光迅速反应，精确调制来去除背景噪音，从而不仅能够得到与传统拉曼光谱一样的谱图，而且信号强度高了几个数量级。利用这种方法和RNAi筛选相结合，研究人员就能在生理条件下寻找脂肪储存调控基因了。经过实验分析，研究人员从272个基因中找到了9个关键调控因子。
将SRS显微技术与RNAi技术结合起来，能帮助研究人员在线虫的活性生理条件下观察脂肪代谢调控，而且这种方法无需标记，极大的简化了样品准备过程，适用于模式生物的细胞追踪，也有利于高通量筛选分析。
相关方法：受激拉曼散射显微技术
完成人：谢晓亮课题组
实验室：美国贝勒医学院分子与人类遗传学系、赫芬顿老年研究中心 美国麻省总医院分子生物学系 美国哈佛大学医学院遗传学系、化学与化学生物学系、物理系 美国哥伦比亚大学化学系 Identification of genes regulating fat accumulation is important for basic and medical research; genetic screening for those genes in Caenorhabditis elegans, a widely used model organism, requires in vivo quantification of lipids. We demonstrated RNA interference screening based on quantitative imaging of lipids with label-free stimulated Raman scattering (SRS) microscopy, which overcomes major limitations of coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy. Our screening yielded eight new genetic regulators of fat storage. RNAi screening for fat regulatory genes with SRS microscopy
原文出处：http://www.nature.com/nmeth/journal/v8/n2/abs/nmeth.1556.html 《自然》两篇文章介绍生物新方法文件类型:PDF/Adobe Acrobat- 文字版《自然》两篇文章介绍生物新方法 《自然》子刊:人为什么会发烧 董孟秋·科学:蛋白质... 期抑制蛋白p21Cip1 和p27Kip1 的过量表达.进 一步RNA干扰实验妨碍吸纳cAMP依赖...www.ebiotrade.com/...h0813.pdf-2011-01-26-新方法" 生命科学研究快报文件类型:DOC/Microsoft Word- 文字版生命科学研究快报 2004年第28期(总第63期) (仅供内部参考) 目录 【科技发展动态:科技... SARS专题 美国国家卫生院开始首次SARS疫苗试验 美科学家发现非典病毒特异RNA片...www.library.sh.cn/...04/63.doc-2010-11-15-生命科学研究快报" 散论-46 请关注《丁香园》对杨鸿智的批评 - 医学&生命科学专业...发表时间：2005-11-25回帖数：19在此处刊登广告对杨鸿智的《后现代理论医学》的批评意见 作者: 中国医药信息学会北京... 《丁香园> 医药生命科学动态跟踪》yukilsh:杨老师的观点不错.我们实验室曾研究过...bbs.tongji.net/thread-31482... - 2011-02-01-快照-生命科学专业..."[标签:content2]
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作者:admin@医学,生命科学 2011-02-25 12:04
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